Microscopic alterations in Fasciola hepatica from sheep treated with albendazole / Alterações microscópicas em Fasciola hepatica de ovelhas tratadas com albendazol

Abstract Currently, albendazole is one of the most commonly used drugs because of its affordability. The objective was to evaluate the histopathology of Fasciola hepatica specimens. For this, the efficacy test was performed on sheep treated with albendazole at the dose recommended for F. hepatica, in which the helminths recovered at necropsy were counted and separated for histology. Spermatogenic cells from parasites recovered from treated and control sheep were examined by microscopy. The fecal egg-count reduction test revealed 97.06% efficacy of albendazole in the treatment of F. hepatica. Changes in testicular tubule cells started 48 hours after treatment and became evident within 72 hours, at which point it became difficult to identify cell types. Primary and secondary spermatogonia became increasingly rare and intercellular vacuolization was more evident. Signs of apoptosis, with pycnotic nuclei and evidence of keriorrexia were observed at all times. Cell debris was identified 96 hours after treatment. The results indicated that parasitic spermatogenesis was severely affected by albendazole and demonstrated the importance of the use of histopathology for the diagnosis of therapeutic efficacy in field strains.

Resumo Na atualidade, o albendazol é uma das drogas mais usadas devido à sua acessibilidade econômica. O objetivo foi avaliar a histopatologia dos espécimes de Fasciola hepatica. Para isso, foi realizado o teste de eficácia em ovinos tratados com albendazol na dose recomendada para Fasciola hepatica, no qual os helmintos recuperados em necropsia foram contabilizados e separados para histologia. As células espermatogênicas de parasitas recuperados de ovinos tratados e controle foram examinadas por microscopia. O teste de redução de ovos por grama de fezes revelou 97,06% de eficácia do albendazol no tratamento de F. hepatica. As alterações nas células dos túbulos testiculares iniciaram-se 48 horas após o tratamento e tornaram-se evidentes em 72 horas, altura em que tornou-se difícil identificar os tipos de células. As espermatogônias primárias e secundárias tornaram-se cada vez mais raras e a vacuolização intercelular foi mais evidente. Sinais de apoptose, com núcleos picnóticos e evidência de cariorrexia foram observados em todos os momentos. Os detritos celulares foram identificados 96 horas após o tratamento. Os resultados indicaram que a espermatogênese parasitária foi severamente afetada pelo albendazol e demonstrou a importância do uso da histopatologia para o diagnóstico de eficácia terapêutica em cepas de campo.

MOLLUSCICIDAL AND LARVICIDAL ACTIVITIES OF Atriplex inflata AERIAL PARTS AGAINST THE MOLLUSK Galba truncatula, INTERMEDIATE HOST OF Fasciola hepatica / Atividade moluscicida e larvicida das partes aéreas de Atriplex inflata contra o molusco Galba truncatula, hospedeiro intermediário da Fasciola hepatica

Fasciolosis is a widespread parasitosis of farm live-stock in many developing countries. For this reason, it is necessary to search for new substances against parasitic diseases caused by flukes. Indeed, a wide variety of terrestrial plants have been subjected to chemical and pharmacological screening in order to discover their potential for human medicinal use. The molluscicidal and larvicidal activities of Atriplex inflata were tested on Galba truncatula and Fasciola hepatica larval stages infecting this snail in Tunisia. Phytochemical tests were conducted on extracts in order to establish a meaningful relationship with molluscicidal and larvicidal activities. The molluscicidal activity was evaluated by subjecting snails to sample aqueous solutions. Accordingly, hexane, ethyl acetate, methanol and methanol-water (8:2, v-v) were used as extraction solvents. As a result, hexane and ethyl acetate extracts showed potent activity, according to the World Health Organization, giving LC50 = 7.59 mg/L and 6.69 mg/L for hexane extracts of leaves and fruits, respectively. Ethyl acetate extracts gave LC50 = 5.90 mg/L and 7.32 mg/L for leaves and fruits, successively. Molluscicidal activities of powders were less potent on snails, but active according to the World Health Organization. Hexane and ethyl acetate extracts from leaves and fruits gave potent larvicidal activities with a delay rate exceeding 45.50% (45.50- 98.92%). Phytochemical tests showed that these activities may be attributed to the presence of triterpenoids and/or sterols.

Fasciolose é uma parasitose generalizada que ocorre em animais de fazendas em muitos países em desenvolvimento. Por esta razão, é necessária a busca de novas substâncias contra as doenças parasitárias causadas por vermes. De fato, uma grande variedade de plantas terrestres foi objeto de testes farmacológicos e químicos a fim de descobrir o seu potencial para utilização em terapêutica humana. As atividades moluscicida e larvicida de Atriplex inflata foram testadas contra estágios larvários de Galba truncatula e Fasciola hepatica infectando este caracol na Tunísia. Testes fitoquímicos foram realizados com extratos a fim de estabelecer uma relação significativa com as atividades moluscicida e larvicida. A atividade moluscicida foi avaliada submetendo os caracóis a soluções aquosas. Conforme o caso, hexano, acetato de etilo, metanol e metanol-água (8:2, v-v) foram utilizados como solventes de extração. Como resultado, hexano e extratos de acetato apresentaram atividades potentes de acordo com a Organização Mundial de Saúde, resultando em LC50 = 7,59 mg/L e 6,69 mg/L para extratos de hexano de folhas e frutos, respectivamente. Extratos de acetato de etilo resultaram em LC50 = 5,90 mg/L e 7,32 mg/L para as folhas e frutos sucessivamente. Atividades moluscicidas das substâncias sob a forma de pó foram menos potentes em caracóis, mas ativas de acordo com a Organização Mundial de Saúde. Hexano e extratos de acetato de folhas e frutos apresentaram atividade larvicida potente, com uma taxa de atraso superior a 45,50% (45,50-98,92%). Testes fitoquímicos mostraram que estas atividades podem ser atribuídas à presença de triterpenóides e/ou esteróis.

In vitro PHYTOTHERAPY OF VECTOR SNAILS BY BINARY COMBINATIONS OF LARVICIDAL ACTIVE COMPONENTS IN EFFECTIVE CONTROL OF FASCIOLIASIS / Fitoterapia in vitro de caramujos vetores por combinações binárias de componentes ativos larvicidas como controle efetivo de fasciolíase

SUMMARY A food-borne trematode infection fascioliasis is one among common public health problems worldwide. It caused a great economic loss for the human race. Control of snail population below a certain threshold level is one of the important methods in the campaign to reduce the incidence of fascioliasis. The life cycle of the parasite can be interrupted by killing the snail or Fasciola larva redia and cercaria inside of the snail Lymnaea acuminata. In vitro toxicity of different binary combinations (1:1 ratio) of plant-derived larvicidal active components such as citral, ferulic acid, umbelliferone, azadirachtin and allicin against Fasciola redia and cercaria were tested. The mortality of larvae was observed at 2h, 4h, 6h and 8h of treatment. In in vitro condition azadirachtin + allicin (1:1 ratio) was highly toxic against redia and cercaria (8h LC50 0.006 and 0.005 mg/L). Toxicity of citral + ferulic acid was lowest against redia and cercaria larvae. .

RESUMO A infecção alimentar pelo trematóide da fasciolíase é uma dentre os mais comuns problemas de saúde pública mundiais, causando grande prejuízo econômico para a humanidade. Controle da população de caramujos abaixo de determinado nível é um dos métodos no campo mais importantes para a redução da incidência da fasciolíase. O ciclo de vida do parasita pode ser interrompido pela morte do caramujo ou da larva redia e cercária da Fasciola dentro da Lymnaea acuminata. Foi testada a toxicidade in vitro das diferentes combinações binárias (relação 1:1) entre os vários componentes larvicidas ativos da planta tais como citral, ácido ferúlico, umbeliferone, azadiractina, e alicina contra a Fasciola redia e a cercária. A mortalidade das larvas foi observada após duas, quatro, seis e oito horas de tratamento. A condição in vitro azadiractina + alicina (relação 1:1) foi altamente tóxica contra redia e cercária (8h LC50 0,006 e 0,005 mg/L). Toxicidade do citral + ácido ferúlico foi a mais baixa contra redia e larvas de cercária. .

Study of some immune aspects in patients with fascioliasis before and after commiphora molmol [mirazid] treatment

This study was planned to evaluate the in vitro production of IL-1 beta and IL-4 by peripheral blood mononuclear cells [PBMCs] and total IgE in patients with fascioliasis before and three months after treatment with purified extract of myrrh from Commiphora molmol tree [mirazid], to determine the role of these variables in the immunopathogenesis of the disease in relation to this new drug. The study was carried out on a total of 35 patients with chronic fascioliasis with an age range from 9 to 45 years, in addition to 10 healthy subjects with matched age and sex serving as controls. Serum IgE and in vitro IL-1 and IL-4 were estimated by enzyme immunoassay [ELISA] before and three months after therapy. The study concluded that mirazid is an effective fasciolicidal drug. IL-1 may be involved in the disease immuno-pathogenesis and the depressed IL-4 may be a phenomenon of the parasite immune suppression. A complete decline of total IgE is not an early criterion of cure

Monitoreo inmunológico del éxito terapeútico en fasciolosis ovina empleando un antígeno semipurificado de < 30 kda / Immunological monitoring of chemotherapeutic success in ovine fasciolosis using a semipurified antigen of < 30 kda

Se evaluó el valor predictivo de éxito terapéutico de una fracción semipurificada de < 30 kDa de Fasciola hepatica, empleando ELISA y western blot (WB) en el reconocimiento antigénico por parte de ovinos infectados. Quince ovinos fueron infectados naturalmente después de permanecer un mes en un predio de una zona endémica. Los ovinos fueron evaluados individualmente cada mes, durante 12 meses, mediante examen coprológico, ELISA y WB. A los seis meses, seis de los quince corderos fueron tratados con un fasciolicida. Se emplearon sueros controles negativos y positivos a F. hepatica y pools de sueros ovinos con otras parasitosis y sin fasciolosis. Los resultados indicaron que el día 0, todos los ovinos y sus sueros fueron negativos a fasciolosis, según el examen coprológico, WB y ELISA respectivamente. El efecto del tratamiento fasciolicida en los 6 corderos tratados, se tradujo en la disminución gradual de los niveles de anticuerpos siendo significativas las diferencias entre tratados y controles a los 4 meses post tratamiento (p.t) (p>0,05) y siendo 5 de los 6 sueros de corderos tratados, negativos a ELISA después de 6 meses p.t. Mediante WB, se determinó que a los 2 meses p.t, la mitad de los ovinos tratados no lograron reconocer las bandas de 29 y 14 kDa (consideradas como altamente sensibles y específicas en el diagnóstico de fasciolosis). Hubo diferencias significativas en la proporción de positivos entre los ovinos tratados y controles a los 2 meses p.t. (p<0,05). A los 5 meses p.t., hubo total ausencia de reconocimiento de las bandas de < 30 kDa y 14 kDa en los ovinos tratados. Los exámenes coprológicos señalaron la ausencia de infección en los corderos tratados, lo que fue corroborado posteriomente por la necropsia, la que a su vez, desmostró la infección en los ovinos no tratados. Se concluye que la fracción semipurificada de < 30 kDa ensayada, contiene polipéptidos que ofrecen un gran potencial, no sólo desde el punto de vista diagnóstico sino que también como una herramienta a emplear para predecir el éxito terapéutico después de un tratamiento fasciolicida

Cinética de excreción de huevos y títulos de anticuerpos a Fasciola hepatica, en gando bovino tratado con triclabendazol en clima cálido-húmedo en México / Kinetics of egg-excretion and antibody titres of Fasciola hepatica in cattle treated with triclabendazole in humid warm climate in Mexico

El objetivo fue determinar la prevalencia, la intensidad en la excreción de huevos y los títulos de anticuerpos anti-Fasciola hepatica expresados en densidades ópticas, en ganado vacuno tratado con triclabendazol cada 56 y 112 días durante 7 meses. Se utilizaron 42 bovinos divididos en tres grupos de 14 animales cada uno. El grupo A fue tratado con triclabendazol cada 56 días, el B cada 12, el C fue el testigo. Se emplearon las técnicas de sedimentación y Elisa. En el grupo A el número de animales positivos se redujo del 100 por ciento (día 0) a 0 por ciento (día 168). La media de huevos se redujo de 86.57 ñ 10.5 (día 0), a 0 (día 168). En el grupo B el número de animales positivos se redujo de 100 por ciento (día 0) a 14.28 por ciento (día 168), y la media de huevos de 82.85 ñ 14 (día 0) a 0.85 ñ 0.5 (día 168). En el grupo C la prevalencia siempre fue de 100 por ciento y la media de huevos excretados fluctuó de 68.14 a 78.85 durante el estudio. Entre el grupo A y el B se observaron diferencia estadísticas (P ó 0.05) en los días 84 y 112, 140 y 168 y siempre hubo diferencias con el grupo C (P ó 0.01) después del tratamiento. Las densidades ópticas se encontraron por debajo de 0.679 nm. No se encontraron diferencias estadísticas (P = 0.05) en el mismo grupo ni entre los tres grupos. La correlación entre títulos de anticuerpo y la excreción de huevos fue baja (0.26, 0.0022 y 0.011) para los grupos A, B, y C, respectivamente. Se concluye que el tratamiento con triclabendazol en ganado vacuno, aplicado cada 56 días, reduce significativamente (Pó 0.05) la excreción de huevos de F. Hepatica en comparación con el aplicado cada 112 días, y la correlación entre la cantidad de huevos y los títulos de anticuerpos expresados en densidades ópticas fueron bajas

Clinical trial of triclabendazole on human fascioliasis: long term follow-up

Following an outbreak of human fascioliasis in Gilan province of Iran in 1989, the benzimidazole derivative triclabendazole [TCBZ] was suggested as the drug of choice after finding out that routine drugs were not effective. Two studies were performed: a clinical trial [before/after type] in 1989 and a historical cohort [1989 - 1995] to examine the efficacy of the drug. TCBZ was administered to 94 patients in four groups [A, B, C and D] according to the drug's instructions [time, size and frequency of dose]. The patients were followed up clinically and paraclinically for 60 days. The highest cure rate, i.e., omission of eggs and improvement of clinical symptoms [86.6%] was observed in Group A [5 mg/kg-NPO, 3 days]. Minor epigastric pain and vomiting and some urticaria was reported a few days after administration of the drug. Just a few developed cholangitis and one toxic hepatitis who were all treated satisfactorily. The second study was a 6-year follow-up survey of 50 of the 94 patients. Five cases had epigastric pain, and eggs were detected in the stool exams of two of them. Thus, by demonstrating up to 94% efficacy in the treatment of human fascioliasis in Iran [p<0.002], TCBZ is recommended as the drug of choice

Eficacia fasciolicida de dos compuestos de sintesis química in vitro e in vivo en ovinos / In vitro and in vivo fascioliscide efficacy of two chemical compounds in sheep

Se evaluó la eficacia fascioliscida del 6-cloro-5-(1-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado compuesto alfa, y del 6-cloro-5-(2-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado beta, bajo condiciones in vitro e in vivo. Para ambos compuestos la eficacia in vitro se evaluó a concentraciones de 50, 10, 3.33, 1.11 y 0.37 mg/L, utilizando metacercarias de Fasciola hepática desenquistadas. La eficacia se determinó con base en la sobrevivencia de estos cuatro días posexposición a los químicos. El compuesto alfa mostró una eficacia de 100 por ciento, 100 por ciento, 77.5 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento y el compuesto beta de 100 por ciento, 67.5 por ciento, 1.75 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento, respectivamente. Para la evaluación in vivo, se utilizaron 45 ovinos criollos, los cuales fueron infectados cada uno con 150 metacercarias de Fasciola hepática. Dos meses después, cuando todos lo ovinos se diagnosticaron positivios a los huevos del parásito mediante la prueba de sedimentación, los borregos se subdividieron en 5 grupos de 9 animales cada uno. Los grupos 1 y 2 fueron tratados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del producto alfa, respectivamente. Los grupos 3 y 4 fueron dosificados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del compuesto beta, respectivamente. El grupo 5 fungió como testigo sin tratamiento. Quince días posteriores al tratamiento, los ovinos se sacrificaron para colectar y cuantificar las fasciolas en el hígado. La eficacia fue determinada como porcentaje de reducción de fasciolas en los grupos tratados con respecto al testigo. Los resultados indicaron una eficacia de 80.6 y 86.9 por ciento para los grupos 1 y 2, respectivamente, y de 0.0 por ciento para los grupos 3 y 4, respectivamente. Mediciones de la longitud de fasciolas y peso del hígado, no mostraron algún efecto adverso atribuible a los tratamientos. Se concluye que el compuesto alfa bajo condiciones in vitro e in vivo, mostró una eficacia fasciolicida altamente promisoria y el compuesto beta solamente eficacia aceptable en el escrutinio in vitro

Eficacia fasciolicida del compuesto"alfa" contra estadios juveniles y adultos en ovinos / Fascioliscide efficacy of compound alfa againts juvenile and adult stages in sheep

Se evaluó la actividad fasciolicida del 6-cloro-5-(l-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado compuesto alfa, contra fasciolas de 4 y 8 semanas de edad en ovinos. Se utilizaron 50 ovinos criollos, los cuales se infectaron oralmente con 200 metacercarias de F. hepática. Cuatro semanas después de la infección, todos los ovinos fueron reinfectados cada uno con otras 200 metacercarias. Ocho semanas después a la infección inicial, cuando todos los animales estaban positivos a huevos del parásito, fueron divididos al azar en 5 grupos de 10 animales cada uno. Los grupos 1 al 4, fueron tratados oralmente con el compuesto a una dosis de 10, 15, 22.2 y 30 mg/kg de peso corporal, respectivamente. El grupo 5 permaneció como testigo sin tratamiento. Dos días después del tratamiento, todos los ovinos fueron sacrificados con el fin de colectar y contar las fasciolas presentes en el hígado. La eficacia se determinó como porcentaje de reducción de fasciolas en los grupos tratados, en comparación con el testigo. Los reusltados mostraron que a dosis de 10, 15, 22.2 y 30 mg/kg de peso vivo, el compuesto alfa removió fasciolas de 4 semanas de edad en un 82.2 por ciento, 87.2 por ciento, 90.8 por ciento y 94.3 por ciento y fasciolas de 8 semanas en 81.7 por ciento, 88.1 por ciento, 87.2 por ciento y 90.0 por ciento, respectivamente. La eficacia promedio para ambos estadios de 4 y 8 semanas fue de 82.0 por ciento, 87.6 por ciento, 89.2 y 92.4 por ciento, para las respectivas concentraciones concluye que la eficacia fasciolicida, conferida por el compuesto alfa a las dosis administradas, fue moderadamente aceptable, siendo las dosis de 15 mg/kg la más idónea

Hepatic fascioliasis: case report and review

Os autores relatam um caso bem documentado de fascioliase hepatica (FH) tratado com exito com triclabendazole. As manifestacoes clinicas predominantes foram febre, eosinofilia marcante e dor abdominal. Triclabendazole foi dado em duas doses unicas orais de 10mg/kg cada. Nao houve efeitos colaterais, nem recaidas clinicas ou parasitologicas ate tres meses apos tratamento. Baseados nesta experiencia e em outros poucos dados revistos na literatura, triclabendazole poderia ser uma alternativa terapeutica valida no tratamento da fascioliase humana.